活性定义：
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在74℃，30分钟内，将10 nmol脱氧 核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位（U）。
质量控制：
经过多次柱纯化，SDS-PAGE检测其纯度大于99%；经检测无外源核酸酶活性； PCR方法检测无宿主残余DNA；能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因；室温存放一个月，无明显活性改变。
使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1. PCR反应体系：
| 试 剂 | 50 μl体系 | 终浓度 |
| 10×Pfu PCR Buffer | 5 μl | 1× |
| dNTP Mix，10 mM each | 1 μl | 200 μM each |
| Forward Primer（10 μM） | 1-2 μl | 0.2-0.4 μM |
| Reverse Primer（10 μM） | 1-2 μl | 0.2-0.4 μM |
| Template DNA | <1 μg | <1 μg/reaction |
| Pfu DNA Polymerase, 2.5 U/ μl | 1 μl | |
| RNase-Free Water | up to 50 μl |
注意：
1）用Pfu酶扩增时，引物的纯度要求较高，引物长度大于18个碱基，引物浓度请以终浓度 0.2-0.4 μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
2）镁离子浓度请以终浓度1.5-3 mM作为设定范围的参考。本产品的10×Pfu PCR Buffer中已经含有20 mM镁离子，可根据不同的引物对和模板来调节镁离子浓度，由此优化反应体系。
2. PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 |
| 预变性 | 94℃ | 2min |
|
变性 退火 延伸 |
94℃ 55℃-65℃ 72℃ |
30S 30S 60S * |
| 终延伸 | 72℃ | 5min |
* 延伸时间可以根据产物大小调整，Pfu DNA Polymerase扩增速度为1kb/min
注意：
1）Pfu酶的热稳定性比Taq酶好，对于GC含量很高的模板，变性温度可以提高到98℃，对Pfu酶的活性无影响。
2）一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低2℃，无法得到理想的扩增效率时，适当降低退火温度；发生非特异性反应时，提高退火温度，由此优化反应条件。
3）Pfu酶具有3′-5′外切酶活性，所以Pfu酶扩增时延伸速度远比Taq酶低，延伸时间根据所扩增片段大小设定，本产品的扩增延伸速率为1 kb/1 min,根据目的片段大小可以适当更改延伸时间。
4）可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少，扩增量不足；如果循环次数太多，错配机率会增加，非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
5）本产品具有3′-5′外切核酸酶活性，PCR产物3’端不带“A”,不能直接用于T/A克隆，如需进行T/A克隆则需要在其末端添加“A”或用平末端载体进行克隆。
3. 结果检测：反应结束后取5 µl反应产物，加入适量上样缓冲液后，进行琼脂糖凝胶电泳检测。
